目前，隨著FDA批準(zhǔn)了美國公司Moderna研發(fā)的新冠肺炎疫苗mRNA-1273的緊急使用授權(quán)，基于mRNA的治療方法越來越引起大家的興趣，基于mRNA的研究也越來越多，所以，如何獲得純度高，質(zhì)量高的mRNA越來越受到人們的關(guān)注。

真核細(xì)胞的mRNA是單順反子，其最顯著的特征是具有５'端帽子結(jié)構(gòu)和3'端的poly A的結(jié)構(gòu)，此poly A結(jié)構(gòu)為mRNA的提取提供了有效的途徑，人們利用堿基配對原理，開發(fā)出寡聚(dT)纖維素或寡聚(U)瓊脂糖親和柱分離mRNA的方法，近幾年,mRNA的提取方法又有所改進(jìn)和突破,其中就有mRNA的磁珠分離純化方法。該技術(shù)主要包含2種方法，其一是用生物素標(biāo)記的Oligo(dT)與mRNA3'端的poly A退火形成雜交體，然后用帶有鏈霉親和素的順磁磁珠洗滌并捕獲雜交體，形成雜交體－磁珠復(fù)合體，最后用磁架將此復(fù)合體捕獲；其二是直接用Oligo(dT)磁珠捕獲樣本中的mRNA,進(jìn)一步用無RNase無菌水洗滌，即可獲得純化的mRNA。

接下來，Dr. BEAVER就給大家介紹下1. Oligo dT磁珠的工作原理及應(yīng)用。

1. Oligo dT磁珠的工作原理及應(yīng)用

Oligo dT磁珠是一種表面共修飾了寡聚dT序列,利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之間的堿基配對，因此可以從真核總RNA或者細(xì)胞、動(dòng)植物組織等多種樣本中快速分離純度高且完整的mRNA。經(jīng)Oligo dT磁珠純化的mRNA,可應(yīng)用于RT-PCR, 固相cDNA文庫構(gòu)建、二代測序、Northern Blot分析、引物延伸、基因表達(dá)分析、RACE、RNA測序、親和純化、微陣列、cDNA微陣列、S1核酸酶分析、核糖體酸酶保護(hù)測定等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，還可進(jìn)行mRNA疫苗的研究等。

2. 國產(chǎn)品牌的崛起

海貍公司專注于納米磁珠技術(shù)和產(chǎn)品開發(fā)。公司10年來，技術(shù)不斷迭代，已經(jīng)完成了第一代蛋白分離純化磁珠、第二代核酸純化磁珠及第三代免疫檢測磁珠的研發(fā)和規(guī)?；a(chǎn)。海貍技術(shù)團(tuán)隊(duì)經(jīng)過2年多的研發(fā)和驗(yàn)證，推出BeaverBeads Oligo (dT)磁珠，可用于mRNA的純化。

BeaverBeads Oligo (dT)產(chǎn)品特點(diǎn)：

a) 表面活性位點(diǎn)豐富，mRNA捕獲效率高

b) 非特異性吸附低，mRNA純度高

c) 粒徑均一，懸浮性好，沉降速率低

d) 磁響應(yīng)時(shí)間短，可適用于自動(dòng)化操作

e) 工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)，批次穩(wěn)定

應(yīng)用案例一：

樣本：人細(xì)胞Total RNA

上樣量：300ng Total RNA

磁珠用量：20-50μL

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)操作過程中，BeaverBeads Oligo (dT)磁珠的懸浮性與進(jìn)口品牌D相當(dāng)。從人細(xì)胞total RNA樣本中純化mRNA，采用熒光定量PCR對樣本進(jìn)行定量檢測，對mRNA（特異性）和sRNA（非特異性）檢測的Ct值偏差＜0.1，兩品牌磁珠無明顯差異。

應(yīng)用案例二：

樣本：植物Total RNA

上樣量：600ng Total RNA

磁珠用量：20-50μL

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：BeaverBeads Oligo (dT)磁珠，懸浮性與進(jìn)口品牌D相當(dāng)，從植物的total RNA樣本中純化mRNA，采用熒光定量PCR對樣本進(jìn)行定量檢測，對mRNA（特異性）和sRNA（非特異性）檢測的Ct值偏差＜0.15，兩品牌磁珠無明顯差異。

產(chǎn)品信息：

全國限量50份試用裝申請鏈接